本发明提供了一种水解酶及其在生物催化合成4"‑甲氨基‑5′‑羟基‑阿维菌素中的应用，所述水解酶的氨基酸序列选自SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：7所示中的一条。本发明筛选出的水解酶，可将甲维盐合成过程中的脱保护反应用生物催化方法取代。以5‑O‑甲酸烯丙酯基‑4"‑甲氨基‑‑阿维菌素为底物，利用酯酶的水解作用，得到产物4"‑甲氨基‑5′‑羟基‑阿维菌素，可避免复杂的化学合成过程，为生物法合成产物4"‑甲氨基‑5′‑羟基‑阿维菌素提供了一条新的途径。
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