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一种乳猪高温教槽料制备所需的乳糖酶的构建方法

申请人:中农华威生物制药(湖北)有限公司 申请日期:2022-06-14 文献日:2022-08-30 等级:0 文献号:CN114958893A 当前状态:公开 类型:发明公开 主分类号:C12N15/70 分类号:C12N15/70 申请编号:CN202210671673.4 省份:湖北省 城市:湖北省黄冈市 申请人地址:湖北省黄冈市蕲春县漕河镇李时珍大道住建大楼三楼006室 申请人地址:湖北省黄冈市蕲春县漕河镇李时珍大道住建大楼三楼006室 发明者:游锡火; 王玉万; 姜本荣; 胡燕; 梁大明; 曾徐浩; 夏胜; 薛栋升; 蒋慧; 田美华; 齐义清; 沈力

总结

本发明公开了一种乳猪高温教槽料制备所需的乳糖酶的构建方法,属于基因工程技术领域。本发明公开的一种乳猪高温教槽料制备所需的乳糖酶的构建方法,包括目的基因扩增;酶切、连接和转化;利用IPTG诱导目的基因的表达,经超声破碎获得蛋白粗酶液;采用Ni‑NTA纯化介质对蛋白粗酶液进行纯化。本发明利用定向进化技术,得到一个在较高的温度下具有更好的催化活性和热稳定性的乳糖酶,比酶活为141.3U/mg(pH7.0,90℃),在100℃半衰期为268.3min。该酶更适宜于高温制粒工艺或高温处理工艺,具有广阔的应用前景,巨大的潜在经济效益。

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