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一种适合饲料高温制粒的内切β-葡聚糖酶的构建方法

申请人:中农华威生物制药(湖北)有限公司 申请日期:2022-06-14 文献日:2022-08-30 等级:0 文献号:CN114958809A 当前状态:公开 类型:发明公开 主分类号:C12N9/24 分类号:C12N9/24 申请编号:CN202210671819.5 省份:湖北省 城市:湖北省黄冈市 申请人地址:湖北省黄冈市蕲春县漕河镇李时珍大道住建大楼三楼006室 申请人地址:湖北省黄冈市蕲春县漕河镇李时珍大道住建大楼三楼006室 发明者:游锡火; 王玉万; 胡燕; 梁大明; 曾徐浩; 夏胜; 薛栋升; 蒋慧; 田美华; 姜本荣; 齐义清; 沈力

总结

本发明公开了一种适合饲料高温制粒的内切β‑葡聚糖酶的构建方法,属于基因工程技术领域。本发明公开的一种适合饲料高温制粒的内切β‑葡聚糖酶的构建方法,包括目的基因扩增;酶切、连接和转化;利用IPTG诱导目的基因的表达,经超声破碎获得蛋白粗酶液;采用Ni‑NTA纯化介质对蛋白粗酶液进行纯化。本发明通过定向进化,得到一个具有高度热稳定性的β‑葡聚糖酶,比酶活为91.6U/mg,在90℃半衰期为1.5h,该酶在饲料领域应用具有巨大潜力。

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